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埃泽思细胞冻存液如何使用,有哪些注意事项

发布时间: 2021-11-19  点击次数: 15次
  埃泽思细胞冻存液是细胞保存的主要方法之一,利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。
  
  细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。
  
  细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。
  
  细胞冻存液主要由FBS、DMSO等组成,是非常经典的一种无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。
  
  埃泽思细胞冻存液操作步骤:
  
  1、培养细胞至对数生长晚起,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。
  
  2、加入适量的通用细胞冻存液,重悬细胞,使细胞浓度达到ml,置于冻存管中,密封,不要拧的太紧,避免弯曲变形。
  
  3、一般进行冻存。亦可采用-20℃30min,-70℃过夜,后置于液氮罐中长期存储。
  
  埃泽思细胞冻存液注意事项:
  
  1、注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染。
  
  2、初次使用融化后可在4℃保存1个月,单应减少反复冻融的次数,以免失效。
  
  3、杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。
  
  4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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